PCR 反应体系配制计算器（含多样本预混）

配 PCR 体系就是对每种组分各算一次 C₁V₁ = C₂V₂：

某组分取样体积 = 终浓度 / 储液浓度 × 反应总体积
补水体积       = 反应总体积 − 各组分体积之和

多样本时要配预混液（master mix），不要一管一管加： 移液器在小体积（< 2 µL）时的相对误差可以到 10% 以上， 逐管加会把这个误差引进每一管；预混一次再分装，误差只发生一次。

预混液要多配一点。 常规做法是按 n + 10% 配（本工具默认）， 因为吸头挂壁和分装残留会让最后一管不够。样本数少时至少多配一管的量。

几个常见错误：

• 终浓度单位没对齐。 引物储液常标 100 µM，终浓度常写 0.2 µM， 中间差 500 倍；dNTP 储液标 10 mM 而终浓度 0.2 mM。单位混用是最常见的翻车点。
• 模板不要进预混液。 每管模板不同，模板必须在分装之后单独加。
• 酶最后加，加完轻弹混匀不要涡旋。 聚合酶怕剪切力。
• 2× Master Mix 产品里已经含有 buffer、dNTP、Mg²⁺ 和酶， 此时只需要算引物、模板和水，不要重复加。