在线科研小工具

DNA / RNA 反向互补序列在线转换

粘贴序列即得反向互补、互补、反向三种结果，支持 FASTA 与 IUPAC 简并碱基。

DNA 序列 GC 含量与 Tm 值在线计算

计算 GC%、碱基组成、分子量与两种经验 Tm，适合快速检查引物。

DNA 序列翻译成蛋白质（六框翻译）在线工具

标准遗传密码表，支持单框与六框翻译、ORF 查找。

FASTA 文件统计：序列数、长度分布与 N50

粘贴 multi-FASTA，立刻得到条数、总长、N50/L50、GC% 和长度分布。

蛋白质分子量、等电点与 280nm 消光系数在线计算

输入氨基酸序列，算出分子量、理论 pI、摩尔消光系数和 1 mg/mL 的 A280。

双序列比对在线工具（Needleman-Wunsch 全局比对）

两条序列全局比对，给出比对结果、得分、一致度与错配/空位统计。

密码子表速查（标准遗传密码）：密码子与氨基酸双向查询

标准遗传密码全部 64 个密码子，支持密码子查氨基酸、氨基酸反查密码子，DNA 与 RNA 写法都认。

氨基酸性质速查表：分子量、侧链 pKa、疏水性与密码子数

20 种标准氨基酸的残基质量、游离分子量、侧链 pKa、Kyte-Doolittle 疏水性与密码子数，支持单字母/三字母/中英文名查询。

常用限制酶识别序列速查表与酶切位点查找

30 种常用限制酶的识别序列、切点、末端类型与平均间隔，并可粘贴序列查找酶切位点（支持线性与环状）。

非标准遗传密码表对照：线粒体、细菌与纤毛虫密码子差异速查

NCBI 全部 27 张遗传密码表，逐个密码子列出与标准表的差异，支持按表号与密码子查询。

密码子偏好性表与稀有密码子扫描（含 CAI 计算）

九个常用物种的密码子使用频率，粘贴 CDS 即可扫描稀有密码子、算 CAI，并给出每个氨基酸在该宿主里的最优密码子。

引物二聚体与发夹结构在线检测（含 3′ 端互补分析）

检测引物的自身二聚体、发夹结构与引物对交叉二聚体，单列 3′ 端连续互补数并画出配对示意。

最近邻法 Tm 计算器

用最近邻热力学模型算引物 Tm，给出 ΔH、ΔS、ΔG37，并把 PCR 缓冲液里的 Mg2+ 与 dNTP 折成钠当量。

FASTQ 质量值换算器

Q 值与错误率互换，并解析 FASTQ 质量串：平均质量按正确算法计算，同时给出 ≥Q20/Q30 占比与期望错误数。

基因组坐标系转换器

BED 与 GFF/VCF/SAM 的坐标差 1，这里一次换清楚，并给出可直接粘贴的 BED 与 GFF 行。

离心机 RCF (g) 与 RPM 在线换算

按转子半径在相对离心力与转速之间双向换算，附常见转子半径参考。

摩尔浓度、质量与体积在线换算

已知任意两项求第三项：浓度、体积、质量，支持 mM/µM/nM 与 mg/µg/ng。

溶液稀释计算器 (C1V1 = C2V2)

母液稀释、倍数稀释、系列稀释一次算清，自动给出需加溶剂体积。

核酸浓度换算：OD260、ng/µL 与 pmol 互转

A260 转质量浓度，ng 与 pmol 互转，支持 dsDNA / ssDNA / RNA / 寡核苷酸。

血细胞计数板细胞浓度在线计算

输入各大格计数与稀释倍数，算出细胞浓度、总细胞数与铺板所需体积。

缓冲液配制计算器（Henderson-Hasselbalch）

按目标 pH 算出酸式与碱式组分的比例和各自需要的质量。

PCR 反应体系配制计算器（含多样本预混）

按储液浓度与终浓度算出每种组分取样量与补水量，支持多样本批量预混。

DNA / RNA 拷贝数在线计算（质粒标准品、qPCR、ddPCR）

由浓度和长度算出每微升拷贝数、每管拷贝数与单拷贝质量，并生成标准曲线稀释方案。

引物复溶与稀释计算器

冻干引物复溶加多少水、配工作液怎么稀释，一次算清，并给出这管够做多少个反应。

转化效率计算器

按 CFU/µg 算感受态转化效率，自动折算铺板比例——漏掉这一步会让结果差一个数量级。

细胞培养板与培养瓶换算器（面积 / 接种量 / 加药体积）

按生长面积在培养板、皿、瓶之间换算接种细胞数与加药体积——细胞数跟面积走、药量跟培养基走，而这两个比例并不相等。

百分比浓度换算器（% w/v、% w/w、% v/v、ppm 与 mol/L 互转）

试剂瓶上的 37% 和方案里的 12 mol/L 是同一瓶浓盐酸——% (w/v)、% (w/w)、% (v/v)、ppm、g/L、mol/L 一次换算清楚，并说明它们差在哪。

OD₆₀₀ 与菌液浓度换算（稀释回算 / 酶标仪光程校正 / 接种量反推）

由 OD₆₀₀ 读数算 cells/mL 与总菌数，自动做稀释回算与光程折算，并按读数判断有没有落在线性区——超出线性区的读数会让菌数稳定偏低。

凝胶条带大小估算（DNA bp / 蛋白 kDa，半对数标准曲线）

输入 marker 各带的大小与迁移距离，拟合半对数标准曲线估算未知条带；并指出两个常见错误——在两条带之间按大小线性内插（永远高估），以及对跑出 marker 范围的条带给估计值（那是外推）。

细胞传代比例与汇合时间计算（按倍增时间反推该按几比几分）

输入当前汇合度、倍增时间与目标汇合度，算出按 1:N 传代后多久长回来，或反过来推该按几比几分——分得稀一倍只多买一个倍增周期，不是多买一倍时间。

平板菌落计数与 CFU/mL 换算（可计数范围 / ISO 加权平均 / 泊松误差）

输入各稀释度平板的菌落数，自动判断哪些板可数、按 ISO 4833 加权平均算 CFU/mL，并给出由计数本身带来的误差——可计数范围不是规矩，是 1/√n 定的。

离心 k 因子与转子间时间换算（同样的 g 力，换个转子时间不一样）

由 r_min、r_max 与额定转速算转子 k 因子，按 k 折算换转子后的等效离心时间；RCF 只说明力有多大，沉降要多久还取决于颗粒要走多远。

Gibson 无缝组装片段用量计算器（多片段摩尔比与 pmol 换算）

按载体长度与用量算出每个插入片段该加多少 ng，自动区分 2–3 片段与 4–6 片段两档推荐量，并检查总 pmol 是否落在协议区间内。

酶切体系配制计算器（单位用量、甘油上限与配比）

由 DNA 量与底物类型算出所需酶单位和体积，核对终体系甘油是否超过 5% 这条星号活性的线，并给出 DNA / 缓冲液 / 酶 / 水的完整配比。

缓冲液配制计算器（TAE / TBE / PBS 与自定义配方的称量换算）

选配方、填浓缩倍数与体积，直接给出每个组分称多少克或量多少毫升，算式逐项列出；并提示 EDTA 不调 pH 不溶、Tris 的 pH 随温度变这两个坑。

琼脂糖凝胶浓度选择与称量计算器（附 TBE / TAE 取舍）

按要分辨的片段范围选琼脂糖浓度、按胶盘尺寸算该称多少克，并说明 TBE 与 TAE 该怎么选——这一条影响的是切胶回收之后的下游反应。

渗透摩尔浓度计算器（mOsm 换算与等渗判断）

按「浓度 × 解离粒子数」算出溶液的渗透摩尔浓度，可代入渗透系数 φ 折算实际值，并与血浆 275–295 mOsm/kg 比较判断等渗、高渗还是低渗。

分子量计算器：由化学式算摩尔质量与称量克数

输入化学式算出摩尔质量，支持嵌套括号与水合物（CuSO4·5H2O），并按目标浓度和体积直接给出该称多少克。原子量取 CIAAW 简略标准原子量。

完全培养基配制计算器（血清与添加剂按终体积反算）

填终体积、血清比例和各添加剂的母液倍数，算出基础培养基该取多少、每样加多少；并算给你看「把基础培养基当起始体积」会让血清差多少。

放射性同位素衰变计算器（³²P / ³⁵S / ¹²⁵I / ³H 剩余活度）

按半衰期算出参考日之后还剩多少活度、要多取几倍体积才等效，并给出剩一半、四分之一、一成各需要多少天。

硫酸铵盐析计算器：蛋白质分级沉淀的固体用量

填初始与目标饱和度、溶液体积和操作温度，算出需要加多少克固体硫酸铵，并给出加盐后的体积增量；常数取自 Wingfield (2001) Appendix 3F 的实测表，四个温度各有自己的值。

动物给药量计算器（mg/kg 剂量 → 注射体积 / 批量备药）

输入剂量 (mg/kg)、体重与药液浓度，算出注射体积；支持批量备药并给出各途径最大注射量参考。

比尔-朗伯定律计算器：吸光度、消光系数与浓度互算

输入吸光度、摩尔消光系数、浓度与光程中的任意三个，立刻求出第四个——酶活测定、NAD(H)动力学与小分子定量的日常换算。

缓冲液 pH 温度校正计算器（Tris / HEPES / MOPS）

输入配制温度与使用温度，即得缓冲液 pH 漂移量与室温应调目标值；Tris 每升温 10°C 偏移 0.28 pH，是磷酸盐缓冲液的十倍以上。

圆二色光谱平均残基椭圆率计算器（CD [θ]MRE 与 Δε）

输入 CD 仪器输出的椭圆率（mdeg）、蛋白浓度与光程，即得平均残基摩尔椭圆率 [θ]MRE 和摩尔圆二色性 Δε，内置光程单位换算提示，规避最常见的数量级错误。

ChIP-qPCR 百分比输入法计算器（% Input 富集分析）

输入保留比例与各组 Ct 值，算出各位点 % Input 富集值；支持批量位点与 IgG 对照归一化，避免「忘乘稀释倍数」这一最常见的数量级错误。

克隆存活分析计算器：平板效率与存活分数

输入各组铺板数与克隆数，算出平板效率 PE 和各剂量点存活分数 SF；多剂量点自动拟合线性二次模型，给出 α、β 与 α/β 比值。

数字PCR（ddPCR）绝对定量计算器：泊松公式与置信区间

由阳性液滴数与总液滴数，用泊松修正算出拷贝数浓度和 95% 置信区间；适用于 Bio-Rad QX200 等液滴数字 PCR 平台，无需标准曲线。

透析换液轮次计算器（脱盐 / 去咪唑 / 缓冲液置换）

按缓冲液与样品体积比算出透析所需轮次和各轮残余浓度，并直观量化多轮换液相比一次大体积透析究竟好多少。

细菌 / 细胞倍增时间与生长速率在线计算

输入两个对数期时间点的 OD 值或细胞计数，计算倍增时间（Generation Time）、比生长速率 μ 与增殖代数，并可预测任意时间点的菌量或细胞数。

细胞实验药物配液计算器（DMSO 母液 · 工作液稀释 · 孔内 DMSO 浓度）

由药物质量与分子量算 DMSO 母液配制量；核算每孔加样体积与孔内 DMSO 百分比；加样量低于移液器精度下限时给出水相中间稀释方案。

双荧光素酶报告基因归一化计算器（Firefly / Renilla 相对荧光素酶活性）

粘贴孔板读数即算每孔归一化活性，按组求均值与标准差，对照组自动归一为 1，输出折叠诱导倍数——避免忘除 Renilla 内参导致的数量级误判。

荧光染料标记度（DOL）计算器：抗体与蛋白质荧光标记化学计量

由 A₂₈₀ 与染料峰值吸光度算出标记度（DOL / F·P⁻¹）和蛋白质浓度，内置 FITC、Alexa Fluor 488/555/647、Cy3/Cy5 常数，自动校正 280 nm 处的染料背景——漏掉这一步会让 DOL 低估超过一倍。

FRET 效率与供受体间距在线计算器（荧光共振能量转移 Förster 公式）

荧光共振能量转移（FRET）三向换算：由距离和 Förster 半径算效率 E、由效率反推间距 R、或由供体荧光淬灭直接算效率，内置 Förster 公式，适用 2–14 nm 分子间距分析。

HPLC 色谱柱效计算器：理论塔板数 N、分离度 Rs 与容量因子 k′

输入保留时间与峰宽，算出理论塔板数 N、板高 H、容量因子 k′ 与分离度 Rs，一次确认柱效状态和两峰能否基线分离。

核酸杂交探针 Tm 与洗膜温度计算器（Northern / Southern Blot）

输入探针类型、长度、GC 含量、杂交液 Na⁺ 浓度和甲酰胺比例，计算探针双链 Tm、推荐杂交温度及高低两档洗膜严格度温度，适用于 Northern、Southern blot 与 ISH 探针设计。

细胞培养 CO₂浓度与培养基 pH 换算器

CO₂浓度、NaHCO₃含量与培养基 pH 三向互算；内置 RPMI / DMEM / MEM 预设，支持海拔校正，让「培养基变黄」有公式可查。

缓冲液离子强度计算器（IEX · SEC · EMSA 条件验证）

按各离子浓度与电荷数算出溶液离子强度 I（mol/L），内置 PBS 等预设，帮你在 IEX 上样和 SEC 跑样前快速核对缓冲液配方。

抑制常数 Ki 计算器（Cheng-Prusoff 公式）

由 IC50、底物浓度与 Km，用 Cheng-Prusoff 公式换算酶抑制剂的真实亲和力常数 Ki，支持竞争性、非竞争性与反竞争性三种抑制机制。

DNA 连接反应计算器（载体与插入片段用量 / Ligation）

输入线性化载体的用量与大小、插入片段大小及目标摩尔比，自动计算连接所需插入片段质量与各组分 fmol 数，适用于 T4 连接酶黏端和平端克隆。

限量试剂与理论产率计算器（合成反应 / 生化反应）

输入各反应物的分子量、用量与化学计量系数，立刻找出限量试剂、算出理论产率与百分产率——摩尔比换算是合成实验最容易出错的一步。

液液萃取效率计算器（多次萃取优化与分配系数）

按分配系数和体积算出每轮萃取的累积回收率；支持弱酸/碱的 pH 分配比校正，并对比少量多次与单次大体积萃取的效率差异。

质谱质量误差计算器：ppm 误差与质量窗口在线换算

输入实测与理论 m/z，立刻得到 ppm 误差和 mDa 偏差；或由理论质量和允许 ppm 范围反算 XIC 质量提取窗口，适用于 Orbitrap、Q-TOF 等高分辨质谱日常数据分析。

病毒感染复数 (MOI) 计算器

输入细胞数、目标感染复数与病毒滴度，计算所需病毒体积；基于泊松分布给出理论感染率与单次感染比例，支持由实测感染率反算实际 MOI。

质谱加合物 m/z 计算器（ESI-MS）

输入中性分子精确质量或分子式，算出正负离子模式下各常见加合物（[M+H]+、[M+Na]+、[M+2H]²+ 等）的 m/z 值，并支持由实测 m/z 反算中性质量，适用于 LC-MS/MS 与高分辨质谱的日常数据分析。

NGS 文库摩尔浓度与等摩尔混库计算器（Qubit ng/µL 转 nM）

由 Qubit 浓度与 Bioanalyzer 片段长度算出文库摩尔浓度（nM），并给出稀释加水量与等摩尔混库方案。

PCR 程序运行时间计算器（扩增子大小 × 延伸速率一键估算）

输入扩增子大小与聚合酶延伸速率，自动推算每循环延伸时间与总程序耗时；换用快速聚合酶能省多少时间，一眼看清。

肽段碎片离子 m/z 计算器（b / y 离子 MS/MS 谱图注释）

输入单字母肽段序列，一键得到 b / y 离子的精确单同位素 m/z 值；支持氨甲基化 Cys 与氧化 Met，用于 LC-MS/MS 谱图手动注释与鉴定结果核实。

蛋白质净电荷计算器（pH 依赖性）

输入氨基酸序列与目标 pH，按 Henderson-Hasselbalch 方程估算各可电离基团的带电比例与理论净电荷，辅助离子交换树脂选型与等电点区间分析。

蛋白质纯化追踪表：比活度、得率与纯化倍数在线计算

输入各纯化步骤的体积、蛋白浓度与酶活，一键算出比活度、得率与纯化倍数，生成论文规范的纯化追踪表。

SDS-PAGE 凝胶配制计算器（分离胶与浓缩胶）

输入分离胶丙烯酰胺百分比与每块体积，立即得到各试剂取样量——丙烯酰胺、Tris、SDS、APS、TEMED 与加水量，分离胶与浓缩胶同时给出，支持多块预混。

TCID₅₀ 感染滴度计算器（Reed-Muench 累积法）

输入系列稀释孔板的阳性孔数，按 Reed-Muench 法算出比例距与 TCID₅₀/mL，自动生成累积计数中间表，杜绝方向搞反的低级错误。

转染用量计算器（Lipofectamine 3000 / PEI 按生长面积换算）

按培养容器的生长面积等比换算 Lipofectamine 3000 或 PEI 的 DNA 与试剂用量，给出含 10% 余量的预混体积；换算规则能精确复现厂商协议表上的 24 孔板数值。

皮下肿瘤体积计算器（卡尺测量 / TGI 肿瘤生长抑制率）

由卡尺长径与短径算皮下肿瘤体积（mm³），可选改良椭球体或椭球体公式，并可算肿瘤生长抑制率 TGI。

细胞划痕实验分析计算器：伤口愈合率与迁移速率

输入初始与终点划痕宽度，自动算出各复孔伤口愈合率、均值 ± 标准差与每侧前沿迁移速率，适用于细胞迁移与划痕实验数据的批量汇总。

Z' 因子计算器：高通量筛选 (HTS) 检测质量在线评估

粘贴正负对照读数，一键算出 Z' 因子、S/B、S/N 与变异系数，判断检测系统是否达到高通量筛选质量标准。

多重检验校正在线计算：BH (FDR)、BY 与 Bonferroni

粘贴一列 p 值，一次得到 BH 的 q 值、BY 与 Bonferroni 校正值，三者并列对照。

qPCR 2^-ΔΔCt 相对定量在线计算

粘贴 Ct 表，自动算 ΔCt、ΔΔCt、相对表达倍数与组内离散度。

基因列表交集并集差集在线计算（Venn 集合运算）

粘贴 2–3 组基因/ID 列表，一键得到交集、并集、各自独有，含去重与大小写归一。

log2FC 与倍数变化 (Fold Change) 在线互转

log2FC ↔ 倍数、上调下调百分比，附常用阈值对照表。

标准曲线线性回归与未知样本反算（BCA / Bradford / ELISA）

粘贴标准品浓度与读数，得到斜率、截距、R²，并反算未知样本浓度。

测序深度与数据量在线计算（Lander-Waterman）

在测序深度、reads 数、数据量与基因组大小之间双向换算。

两组比较样本量估算（t 检验 / 比例检验）

按效应量、显著性水平与把握度，估算每组需要多少样本。

群落多样性指数在线计算（Shannon / Simpson / Chao1）

粘贴物种丰度表，算出 Shannon、Simpson、均匀度与 Chao1 丰富度估计。

富集显著性检验在线计算（超几何分布 / Fisher 精确检验）

输入背景基因数、通路基因数、列表长度与重叠数，算出 p 值、富集倍数与期望重叠。

qPCR 扩增效率与 Pfaffl 相对定量在线计算（标准曲线斜率求 E）

用系列稀释的 Ct 拟合标准曲线，算扩增效率 E 与 R²；再按 Pfaffl 公式做效率校正的相对定量。

RNA-seq 表达量归一化在线计算：RPKM / FPKM / TPM 互算

粘贴基因的 read 数与长度，一次算出 RPKM / FPKM 与 TPM，并直接看出 TPM 合计为 100 万而 RPKM 不是。

t 检验在线计算：独立样本 / 配对样本 / 单样本（含 Welch 校正）

粘贴两组数即可算出 t 值、自由度、双尾 p 值、均值差置信区间与 Cohen's d，默认用 Welch 校正。

单因素方差分析在线计算（含两两比较与多重校正）

三组及以上均值比较，给出 F 值、方差分析表、p 值与 η²，并可做两两比较（Bonferroni 或 BH 校正）。

Mann-Whitney U 与 Wilcoxon 符号秩检验在线计算

偏态数据或等级资料的两组比较，给出 U/W 统计量、精确或近似 p 值、效应量，并提示该样本量下最小可能的 p。

卡方检验与 Fisher 精确检验在线计算（含 OR / RR）

列联表独立性检验，给出 Pearson 卡方、Yates 校正与 Fisher 精确 p 值，2×2 表另给优势比与相对危险度及置信区间。

相关系数在线计算：Pearson、Spearman 与 Kendall

一次算出三种相关系数与各自的 p 值，给出 Pearson 的置信区间与 r²，并在结果异常时提示离群点或非线性。

统计检验怎么选：按数据类型、组数与配对关系对照

回答三个问题就能定下用哪种检验：比数值还是比比例、有几组、是否配对。每一行直接链到对应工具。

米氏方程 Km 与 Vmax 计算（非线性拟合 + 三种线性化对照）

输入若干组底物浓度与反应速率，用非线性拟合求 Km 与 Vmax，并把 Lineweaver-Burk、Hanes-Woolf、Eadie-Hofstee 三种线性化的结果并排列出——它们的分歧本身就是数据质量的读数。

IC50 / EC50 四参数拟合计算器（含数据可信度检查）

输入若干组浓度与响应，用四参数 logistic 拟合 IC50/EC50、Hill 斜率与两端平台，并检查浓度有没有铺到平台、固定斜率会让结果偏多少——这两件事比 R² 重要。

Kaplan-Meier 生存曲线与 log-rank 检验计算器

贴两组的「时间 状态」数据，算出各组 Kaplan-Meier 生存表、中位生存期，以及 log-rank 检验的 χ² 和 p 值；逐时刻明细可直接与教科书演算核对。

药代动力学非房室分析（NCA）：AUC、半衰期、清除率在线计算

贴浓度-时间数据和给药剂量，算出 AUC(0→t)、外推到无穷的 AUC、λz 与半衰期、MRT、清除率和表观分布容积；默认用 linear-up/log-down，并算给你看纯线性梯形会高估多少。

ROC 曲线与 AUC 计算器（含 Hanley-McNeil 置信区间）

贴阳性组与阴性组的评分，算出 ROC 表、AUC（梯形法与一致对法互相校验）、Hanley-McNeil 置信区间、Youden J 最优阈值和 Mann-Whitney 检验；也可只填已发表的 AUC 与样本量求置信区间。

诊断试验四格表计算器：灵敏度 / 特异度 / 阳性预测值

输入 TP/FP/FN/TN 四格，一次算出灵敏度、特异度、阳性与阴性预测值、似然比与约登指数，给出 95% Wilson 置信区间，并可用贝叶斯公式更新后验概率。

哈迪-温伯格平衡计算器：等位基因频率、基因型频率与 HWE 偏离检验

输入次等位基因频率或观测基因型计数，给出 HWE 期望频率与 χ² 偏离检验，适用于 GWAS 质控、隐性遗传病携带率估算与遗传风险计算。

投稿图件尺寸与分辨率换算（mm / inch / px / DPI）

按期刊要求的栏宽和 DPI 算出图片应有的像素尺寸，并反查现有图片是否达标。

中英混排字数统计（摘要 / 投稿字数限制）

分别统计中文字符数、英文单词数与总字符数，支持排除参考文献与图表标题。

显微镜像素尺寸与 Nyquist 采样（放大倍率够不够，看的是像素不是倍数）

由相机像元、物镜倍率与 NA 算样品面有效像素尺寸（µm/像素）、衍射极限分辨率，并判断是否满足 Nyquist 采样；顺带换算视场宽度与比例尺像素数。

z 堆栈层间距计算器（轴向分辨率与 Nyquist 采样）

填成像方式、发射波长、NA 和浸没介质，算出轴向分辨率和该用多大的 z 层间距，顺带给出拍指定深度要多少层；并说明反卷积为什么要求更密的步长。