缓冲液配制计算器（Henderson-Hasselbalch）
缓冲液的 pH 由共轭酸碱对的比例决定，不是由总浓度决定：
pH = pKa + log₁₀( [A⁻] / [HA] )
反过来，已知目标 pH 就能求比例：[A⁻]/[HA] = 10^(pH − pKa)。
再配合总浓度和体积，就能算出两种组分各需要多少摩尔、多少克。
选缓冲对的原则：目标 pH 应落在 pKa ± 1 以内。 超出这个范围，缓冲能力急剧下降—— 在 pH = pKa 时缓冲容量最大，偏离 1 个单位时比例已经是 10:1，再偏就基本没有缓冲作用了。
几个必须注意的地方：
- pKa 随温度变化。 Tris 尤其明显，约 −0.028 pH/°C：4 °C 配好的 Tris 缓冲液， 升到 37 °C 时 pH 会掉约 0.9。要在使用温度下校准。
- 离子强度会影响实际 pKa，高浓度时计算值与实测值会有偏差，配完必须用 pH 计核对。
- 本工具按理想情况算，给的是起点，不是终点。
一个算例
配 1 L 0.1 mol/L 磷酸缓冲液，目标 pH 7.4（pKa₂ = 7.21）：
[A⁻]/[HA] = 10^(7.4 − 7.21) = 1.549
碱式占比 = 1.549 / (1 + 1.549) = 60.77%
Na₂HPO₄ 0.1 × 0.6077 = 0.0608 mol
NaH₂PO₄ 0.1 × 0.3923 = 0.0392 mol
温度：Tris 和磷酸盐差十倍
pKa 随温度变化，而不同缓冲对的敏感程度差别极大。
| 缓冲对 | 25 °C 的 pKa | dpKa/dT |
|---|---|---|
| Tris | 8.06 | −0.028 / °C |
| 磷酸盐（pKa₂） | 7.21 | −0.0028 / °C |
差了整整一个数量级。后果很具体：在 25 °C 调到 pH 8.0 的 Tris 缓冲液， 放到 4 °C 冷室里实际约为 pH 8.6——偏了 0.6 个单位。 同样的降温，磷酸缓冲液只偏 0.06，可以忽略。
所以做低温实验（层析、冷室孵育）用 Tris 时，必须在使用温度下调 pH， 而不是在室温调好再拿去用。这是低温实验里最常见的隐性误差来源之一。
缓冲容量在哪里最大
在 pH = pKa 时最大，此时酸碱各占一半。偏离 1 个单位时比例已是 10:1， 缓冲能力大幅下降；偏离 2 个单位基本没有缓冲作用。 这就是「目标 pH 应落在 pKa ± 1 以内」这条经验规则的来源， 它不是约定俗成，是从上面的公式直接推出来的。
常见问题
目标 pH 离 pKa 多远还能用？
±1 以内。再远比例超过 10:1，缓冲容量已经很小，应该换一个 pKa 更接近的缓冲对。
为什么按计算配出来 pH 不对？
常见原因是温度不同（Tris 尤其敏感）和离子强度影响。计算值是起点，必须用 pH 计校准。
为什么调好 pH 后稀释，pH 会变？
Henderson-Hasselbalch 用的是浓度比，理想情况下稀释不改变比值、也就不改变 pH。但实际会变，原因是离子强度改变了活度系数，而 pH 计测的是活度不是浓度。稀释十倍通常带来 0.1 个单位以内的漂移。规范做法是按终浓度配好再测 pH。
用酸碱滴定调 pH 和按公式配，哪个对？
两者不冲突：按公式配得到接近目标的起点，再用 pH 计微调。只按公式不测，会因为试剂纯度、结晶水、离子强度而有偏差；只滴定不算，则可能用了远超需要的酸碱量，改变了总离子强度。