细胞培养板与培养瓶换算器（面积 / 接种量 / 加药体积）
换器皿是细胞实验里最日常的一步：预实验在 6 孔板做，正式实验要铺 96 孔板； 细胞在 T-75 里养着，明天要分到 12 孔板上转染。看起来只是按比例缩， 但要缩的两样东西比例不一样，而且这两个比例在同一对器皿之间并不相等。
接种量按面积，加药按体积
贴壁细胞铺得多密，取决于每平方厘米有多少细胞，和培养基加了多少没关系。 所以跨器皿搬接种量，正确的中间量是 cells/cm²：
每孔接种细胞数 = 接种密度 (cells/cm²) × 该器皿的生长面积 (cm²)
药物就不是这样了。终浓度是药量除以液体体积，所以储液该加多少， 跟着培养基体积走，跟面积没有关系。
麻烦就出在这里：面积比和体积比不相等。6 孔板一孔 9.6 cm²、放 2 mL， 96 孔板一孔 0.32 cm²、放 0.1 mL——面积差 30 倍，体积只差 20 倍。 如果把 6 孔板的方案统一「除以 30」搬到 96 孔板，细胞数是对的， 药却只加了该加的 2/3，终浓度直接低三分之一。反过来统一「除以 20」， 药对了，细胞铺密了 1.5 倍。
这个错误不会报错、不会污染、不会让实验失败，只会让剂量-效应曲线整体平移， 而平移的方向和幅度取决于你换的是哪两个器皿——所以它很难在结果里被认出来。
加药的第二个坑：分母是储液浓度还是「储液减终浓度」
设培养基体积 V，储液浓度 C储，想要的终浓度 C终。 加药后总体积会变大，这件事决定了公式长什么样：
| 你的操作 | 加多少储液 | 终体积 |
|---|---|---|
| 直接加进已有的 V 培养基里 | V × C终 ÷ (C储 − C终) | V + 加入量 |
| 配成总共 V（先加药再补培养基到 V） | V × C终 ÷ C储 | V |
两种做法都常见，也都不算错，但给出的体积不一样，比值正好是 C储 ÷ (C储 − C终)。储液倍数越低差得越多：
- 1000× 储液：差 0.1%，忽略无妨
- 100× 储液：差 1%
- 20× 储液：差 5.3%
- 10× 储液：差 11%——这时候还按 V × C终 ÷ C储 算就说不过去了
本工具两种都算给你，并标出差多少。报告方法学时要写清是哪一种， 否则别人复现不出同一个浓度。
96 孔板的外圈不要用
96 孔板外圈那 36 个孔（8 × 12 的四周）蒸发明显快于内圈， 孵箱里放一整天，边缘孔的培养基浓缩、渗透压升高，读出来的数会系统性偏离。 常规做法是外圈只加 PBS 或培养基不铺细胞，实验只用中间 60 个孔。 算板数的时候要按 60 个有效孔算，不是 96 个。
24 孔和 48 孔板也有这个问题，只是没那么严重；培养皿和培养瓶基本不受影响。
悬液体积不能超过该孔的培养基体积
工具会算「每孔取多少细胞悬液、再补多少培养基」。如果你的细胞悬液太稀， 算出来的悬液体积会超过该孔该放的总体积——这时候不是把培养基加超， 而是先离心浓缩细胞悬液。工具遇到这种情况会直接提示。
数据出处
生长面积、推荐培养基体积、参考接种量三列取自 Thermo Fisher / Gibco 的 Useful Numbers for Cell Culture 参考表。 最后一列「折合密度」是用前面两列除出来的（参考接种量 ÷ 生长面积）， 不是另一个来源的数据——各器皿折合下来落在每平方厘米 2.6 万到 3.7 万之间， 这也是工具里默认密度取 3 万 cells/cm² 的由来。
不同厂商的标称面积会有细微出入（尤其是培养皿，按内径算和按实际贴壁面算差一点）， 需要精确时以你手上那批器皿的说明书为准。
常用培养器皿的生长面积与培养基体积
| 器皿 | 生长面积 (cm²) | 推荐培养基 (mL) | 参考接种量 (cells) | 折合密度 (cells/cm²) |
|---|---|---|---|---|
| 6 孔板（每孔） | 9.6 | 1–3 | 0.3 × 10⁶ | 31,250 |
| 12 孔板（每孔） | 3.5 | 1–2 | 0.1 × 10⁶ | 28,571 |
| 24 孔板（每孔） | 1.9 | 0.5–1 | 0.05 × 10⁶ | 26,316 |
| 48 孔板（每孔） | 1.1 | 0.2–0.4 | 0.03 × 10⁶ | 27,273 |
| 96 孔板（每孔） | 0.32 | 0.1–0.2 | 0.01 × 10⁶ | 31,250 |
| 35 mm 培养皿 | 8.8 | 2 | 0.3 × 10⁶ | 34,091 |
| 60 mm 培养皿 | 21.5 | 5 | 0.8 × 10⁶ | 37,209 |
| 100 mm 培养皿 | 56.7 | 12 | 2.2 × 10⁶ | 38,801 |
| 150 mm 培养皿 | 145 | 30 | 5 × 10⁶ | 34,483 |
| T-25 培养瓶 | 25 | 3–5 | 0.7 × 10⁶ | 28,000 |
| T-75 培养瓶 | 75 | 8–15 | 2.1 × 10⁶ | 28,000 |
| T-175 培养瓶 | 175 | 35–53 | 4.9 × 10⁶ | 28,000 |
| T-225 培养瓶 | 225 | 45–68 | 6.3 × 10⁶ | 28,000 |
相关工具
数细胞、算活率与铺板体积见 血细胞计数板计算； 知道倍增时间以后推算什么时候长满见 倍增时间计算； 病毒按细胞数投量见 MOI 计算器； 单纯的母液稀释见 稀释计算器。
常见问题
6 孔板一个孔多大面积？96 孔呢？
6 孔板每孔 9.6 cm²，12 孔 3.5 cm²，24 孔 1.9 cm²，48 孔 1.1 cm²，96 孔 0.32 cm²；T-25、T-75、T-175、T-225 就是 25、75、175、225 cm²；培养皿 35/60/100/150 mm 分别是 8.8、21.5、56.7、145 cm²。数据来自 Gibco 的 Useful Numbers for Cell Culture 参考表，不同厂商标称值会有细微出入。
从 6 孔板换到 96 孔板，所有东西都除以 30 对吗？
细胞数对，药量不对。面积比是 9.6 ÷ 0.32 = 30，但培养基体积比是 2 mL ÷ 0.1 mL = 20。接种细胞数跟着面积走要除以 30，药物储液体积跟着培养基体积走只能除以 20。两边都除以 30 的话，终浓度只有目标的 2/3——这个偏差不会报错，只会让整条剂量-效应曲线平移，很难从结果里认出来。
接种密度该取多少 cells/cm²？
取决于细胞系、倍增时间和你打算什么时候用它，没有通用值。Gibco 参考表里各器皿的参考接种量折合下来是每平方厘米 2.6 万到 3.7 万，本工具默认填 3 万只是这个量级的一个起点。真正该做的是记录自己细胞的密度—汇合时间关系，再按实验需要往上下调。
加药到底是 V×C终÷C储 还是 V×C终÷(C储−C终)？
看你怎么加。直接把药加进已经在孔里的 V 培养基里，总体积会变成 V + 加入量，精确解是 V × C终 ÷ (C储 − C终)；如果是先加药再补培养基到总共 V，那就是 V × C终 ÷ C储。两者的比值是 C储 ÷ (C储 − C终)：1000× 储液差 0.1% 可以忽略，100× 差 1%，20× 差 5.3%，10× 差 11%。储液倍数低的时候必须说清用的是哪一种。
96 孔板的外圈为什么不能用？
外圈那 36 个孔（8 × 12 的四周）与外界接触面大，蒸发明显快于内圈。在孵箱里放一天，边缘孔培养基浓缩、渗透压升高，读数会系统性偏离，而且偏离方向随位置变化。常规做法是外圈只加 PBS 或培养基、不铺细胞，实验只用中间 60 个孔——算需要几块板时按 60 算，不是 96。
算出来每孔要取的悬液体积比该孔的培养基还多，怎么办？
说明细胞悬液太稀了。不要把培养基加超（会改变液面高度和气体交换），正确做法是先离心把悬液浓缩到足够的浓度再铺。本工具会算出需要浓缩到多少 cells/mL，并在超出时直接提示。
培养基该加多少？表里给的是范围怎么选？
范围的下限是维持贴壁细胞代谢的最低量，上限受气体交换限制——液层太厚，底部细胞的氧供会变差。短期实验、需要频繁观察或要做显微成像时取下限，周末不换液、想让细胞多撑一天时取上限。工具允许你手动指定体积，指定之后加药体积会跟着你给的数算，而不是跟着推荐值。