缓冲液配制计算器（TAE / TBE / PBS 与自定义配方的称量换算）

「配一升 50× TAE」不是一道乘法题，它同时涉及三件事： 固体要称多少克、母液要量多少毫升、以及哪一步不按顺序做就配不出来。

怎么算

固体质量(g)   = 目标浓度(mol/L) × 体积(L) × 分子量(g/mol)
母液体积(mL)  = 目标浓度(mol/L) × 体积(L) ÷ 母液浓度(mol/L) × 1000
浓缩倍数      = 每个组分的浓度同时乘以那个倍数

最后一条是关键：浓缩液不是“少加点水”，是每个组分都按同一倍数提高。 本工具把每一项的算式都写出来，可以逐项核对。

可以验算

拿通行配方对一遍——50× TAE、1 升：

Tris 碱        2000 mM × 1 L × 121.14 ÷ 1000 = 242 g
冰醋酸         1000 mM × 1 L ÷ 17.5 mol/L × 1000 = 57.1 mL
0.5 M EDTA       50 mM × 1 L ÷ 0.5 mol/L × 1000 = 100 mL

242 g / 57.1 mL / 100 mL 正是各处配方上写的那三个数， 而它们是从 1× 的 40 mM Tris、20 mM 乙酸、1 mM EDTA 反算出来的。 TBE 与 PBS 同样对得上（见下）。

坑一：EDTA 不调 pH 根本不溶

EDTA 二钠盐在 pH 调到约 8.0 之前不会溶解。 很多人第一次配 0.5 M EDTA 时搅了一下午还是浑的，以为是搅拌不够或者水温不对， 其实是没加 NaOH。正确做法是边加 NaOH 边搅，pH 接近 8.0 时溶液会突然变清。

0.5 M EDTA 每升需要 186.1 g 的 Na₂EDTA·2H₂O（MW 372.24）。 这也是为什么 TAE / TBE 的配方里 EDTA 那一项写的是「多少毫升 0.5 M 母液」 而不是「多少克」——大家都是先配好这瓶母液再用。

坑二：Tris 的 pH 会随温度跑

Tris 的 pKa 温度系数是 −0.028 / °C（25 °C 时 pKa ≈ 8.1）。 也就是说，室温调到 pH 8.0 的 Tris 缓冲液，在 4 °C 下大约是 8.6、 在 37 °C 下大约是 7.7。

后果很实在：冷室里跑的层析、37 °C 的酶反应，实际 pH 都不是你在台面上调的那个。 正确做法是在使用温度下调 pH，或者至少记录调 pH 时的温度。 磷酸盐（PBS）几乎不受温度影响，这是它在细胞实验里更省心的原因之一。

顺带一提：冰醋酸按体积加

冰醋酸是纯液体，约 17.5 mol/L，所以配方里给的是毫升不是克。 量它要在通风橱里，而且先加水再加酸。

相关工具

单一组分的浓度/体积/质量换算见 摩尔浓度计算； 按目标 pH 定酸碱比例见 缓冲液 pH 计算； 百分比浓度与摩尔浓度互换见 百分比浓度换算。

EDTA 的溶解条件与 0.5 M 配法取自 Cold Spring Harbor Protocols 的 EDTA 配方； Tris 的 pKa 温度系数取自试剂厂商公布的缓冲液数据。