转染用量计算器（Lipofectamine 3000 / PEI 按生长面积换算）

换培养格式时，转染用量跟生长面积走，不跟孔数走。

复合物被细胞摄取的量取决于单位面积上的复合物密度，所以唯一稳妥的换算依据是 每孔的生长面积（cm²）：

某格式用量 = 6 孔板单孔用量 × (该格式面积 ÷ 9.6)
预混总量   = 单孔用量 × 孔数 × 1.10（留 10% 余量）

9.6 cm² 是 6 孔板单孔的标称生长面积。

生长面积

这张表取自 Gibco 的 Useful Numbers for Cell Culture， 站上的培养容器换算用的是同一份，两页不会给出不同的数。 （别家厂商的板略有差异，例如 Corning 的 6 孔板标 9.5 cm²、12 孔板标 3.8 cm²； 差一两个百分点，但同一个站里混用两家就会自相矛盾。）

Lipofectamine 3000 的 6 孔板参考用量

厂商协议表上 6 孔板单孔是：

注意 P3000 跟 DNA 走而不是跟面积走——它按 2 µL/µg DNA 计， 只要 DNA 量按面积缩了，P3000 自然跟着缩，但比例始终是 2。

可以验算

拿厂商表上的 24 孔板那一行对一遍：

面积系数 = 1.9 ÷ 9.6 = 0.198
DNA         2.5 × 0.198 = 0.495 µg   （表上 500 ng）
Lipo3000    7.5 × 0.198 = 1.48 µL    （表上 1.5 µL）
P3000       5   × 0.198 = 0.99 µL    （表上 1 µL）

三项都落在厂商表的 1% 以内。差的那一点来自厂商表把 0.198 取整成了 1/5， 而不是换算式子有问题——这说明「用量跟面积走」这个前提和厂商自己给出的 多格式数值是自洽的。

PEI

PEI 体积(µL) = DNA(µg) × 比值

储液取 1 mg/mL 时 µg 与 µL 数值相同，最省事。默认比值 3（µg PEI / µg DNA）， 常见范围 2–4，需要按细胞系优化。PEI 的用量共识远不如 Lipofectamine 明确， 把它当起点而不是终点。

用别的试剂怎么办

选「自定义试剂」，填你手上这支试剂说明书里6 孔板的 DNA 与试剂参考量， 其余格式由工具按面积换算。不给 Lipofectamine 2000 之类的预设， 是因为各家公布的数值分歧较大（同一支试剂 4、10、15 µL 的方案都有）， 与其给一个来路不明的默认值，不如让你照自己的说明书填。

适用边界

• 参考值面向贴壁细胞系的瞬时转染。稳定株筛选所需的量和比例不同。
• 原代细胞、悬浮细胞、T 细胞、神经元通常要专用试剂或电转，这套换算不适用。
• 质粒大于 8 kb、GC 极端或用线性化 DNA 时，最优比例要自己做梯度。
• 工具只管复合物配制这一步。铺板密度、换液时机对效率同样关键，不在范围内。

相关工具

细胞数与培养基体积的跨容器换算见 培养容器换算； 质粒浓度由 OD₂₆₀ 换算见 核酸浓度换算； 传代比例与回长时间见 传代比例。

生长面积取自 Gibco 的 Useful Numbers for Cell Culture； Lipofectamine 3000 的用量取自 Thermo Fisher 公开的试剂协议。